Empleo de la técnica hibridación in situ fluorescente para visualizar microorganismos

Resumen

RESUMEN

La hibridación in situ fluorescente (FISH), es una técnica que emplea sondas de oligonucleótidosmarcadas con fluorocromos las cuales van dirigidas hacia secuencias específicas del ácido ribonucleicoribosomal (ARNr), lo que permite la identificación rápida y específica de células microbianas ya sea queestén como células individuales o se encuentren agrupadas en su ambiente natural. El conocimiento dela composición y distribución de los microorganismos en los hábitats naturales, proporciona un soportesólido para comprender la interacción entre las diversas especies que componen el micro hábitat. Elobjetivo de la revisión es presentar la forma como ha evolucionado la hibridación, el empleo del ARNrcomo molécula diana, los tipos de marcaje, los marcadores fluorescentes empleados hoy en día, lametodología, así como las mejoras que se le han hecho a la técnica FISH al emplearse en conjunto conotras técnicas en la identificación microbiana. Salud UIS 2011; 43 (3): 307-316

Palabras claves: FISH, sonda de oligonucleotidos, ARNr, diagnóstico microbiano,fluorocromo, hibridación

ABSTRACT

Fluorescence in situ hybridization (FISH), is a technique that uses oligonucleotides probes labeled with fluorochromeswhich are directed to specific sequences of ribosomal ribonucleic acid (rRNA), this allows the rapid and specificidentification of microbial cells whether as individual cells or grouped cells in their natural environment. Knowledgeof the composition and distribution of microorganisms in natural habitats provides a solid support to understandinteraction between different species in the microhabitat. This review shows how hybridization has evolved, the useof rRNA as target molecule, the type of labeling, the labeled uses today in fluorescent and the methodology, as wellas the improvements that have been made to the FISH technique when is used in conjunction with other techniquesin microbial identification. Salud UIS 2011; 43 (3): 307-316

Keywords: FISH, oligonucleotides, probes, rRNA, microbial diagnostic, fluorochromes, hybridization